色譜柱是高效液相色譜儀的心臟,在液相色譜儀的使用中,保持色譜柱的柱效、容量和滲透性,延長柱子的使用壽命是非常重要。色譜柱壓力過高、過低都屬于柱壓問題。色譜柱壓升高一般是由于柱床內產生了雜質,造成流體阻力加大所致。譜析色皮小編大致總結為以下幾個方面:
 
1、流動相的前處理:流動相或楊平中雜質堵塞色譜柱進口濾片,導致壓力升高。這是由于流動相可能沒有過濾,或過濾不徹底,使固體雜質滯留于濾板上所致。另一個方面也可能沒有使用預保護柱所致。
 
2、樣品的沉淀:當流動相與溶解樣品的溶劑不一致時,樣品進入色譜柱時,可能因溶解度降低而沉淀出來吸附于柱內,造成壓力升高。
 
3、晶體的析出:使用含有緩沖液的流動相時,緩沖液中的無機鹽可能會殘留在體系之中,它們會因在新流動相中的溶解度降低而析出阻塞而壓力升高。
 
4、細菌或霉菌孳生:流動相中、管路中或柱子進口處繁殖、生長霉菌堵塞濾板,導致壓力升高。所以在使用磷酸鹽緩沖液時一般要現配現用。
 
5、溶質吸附:一些溶質在色譜柱上有較強大的吸附力,洗脫時流動相也難以清除掉,累積的未洗脫溶質也會造成阻力增大從而造成壓力升高。
 
6、流動相更換過度較快:當改變流動相體系時,不徹底的更換使不同性質、互不混溶的流動相存在于同一個體系之中,也會造成壓力升高。
 
7、壓力脈沖:運行過程中,有時會產生整個液相色譜儀
 
系統內壓力的突然升降。如泵壓力變化,此所形成的壓力脈沖會造成多孔填料的崩壞和柱床結構的微小變化,填料微屑的長期積累也可能會使柱床阻力增大,造成壓力升高。

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 以上幾種出現液相色譜儀柱壓升高的原因,譜析色譜小編提出解決方法:處理對于緩沖液鹽分如(乙酸銨等)沉積于柱內的情況先用40~50℃的純水,低速正向沖洗柱子,待柱壓逐漸下降后,相應提高流速沖洗,柱壓大幅度下降后,用常溫純水沖洗,之后用純甲醇沖洗柱子30分鐘;如果柱壓還是降不下來,則可考慮將柱子的進出口反過來接在儀器上,用流動相沖洗柱子。這時,如果柱壓仍不下降,只有換柱子入口篩板,但一旦操作不甚,很容易造成柱效下降,所以盡量少用。