近日,藥監(jiān)局批準(zhǔn)發(fā)布3項補充檢驗方法,分別為《根痛平片中松香酸檢查項補充檢驗方法》《烏雞白鳳丸中擬人參皂苷F11檢查項補充檢驗方法》和《消糜栓中擬人參皂苷F11檢查項補充檢驗方法》,涉及高效液相色譜法和質(zhì)譜法。
 
根痛平片中松香酸檢查項補充檢驗方法
 
(松香酸  高效液相色譜法(中國藥典2020年版通則0512)測定。
 
色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗  以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以乙腈‐0.1%甲酸(88∶12)為流動相;檢測波長為241nm。理論板數(shù)按松香酸色譜峰計算應(yīng)不低于2000。
 
對照溶液的制備(臨用新制)  取松香酸對照試劑適量,精密稱定,加乙醇制成每1ml含10μg的溶液,作為對照試劑溶液。另取11-羰基-β-乙酰乳香酸對照品適量,精密稱定,加乙醇制成每1ml含4μg的溶液,作為參照溶液。
 
供試品溶液的制備  取本品10片,糖衣片除去包衣,研細(xì),取0.2g,精密稱定,精密加入乙醇20ml,稱定重量,超聲處理20分鐘,放冷,再稱定重量,用乙醇補足減失的重量,搖勻,濾過,取續(xù)濾液,即得。
 
測定法  分別精密吸取供試品溶液、對照試劑溶液與參照溶液各10μl,注入液相色譜儀,記錄色譜圖。
 結(jié)果判斷  供試品色譜中,在與松香酸對照試劑溶液色譜峰保留時間相應(yīng)的位置不得出現(xiàn)相同的色譜峰。若出現(xiàn)保留時間相同的色譜峰,采用二極管陣列檢測器比較相應(yīng)色譜峰的紫外-可見吸收光譜,吸收光譜應(yīng)不同(松香酸對照試劑色譜峰在241nm顯示最大吸收);若吸收光譜相同,且該色譜峰的峰面積值大于11-羰基-β-乙酰乳香酸參照溶液色譜峰的峰面積值,則視為陽性檢出。
 
烏雞白鳳丸中擬人參皂苷F11檢查項補充檢驗方法
 
 【檢查】擬人參皂苷F11   照高效液相色譜法(中國藥典2020年版通則0512)和質(zhì)譜法(中國藥典2020年版通則0431)測定。
 
色譜、質(zhì)譜條件與系統(tǒng)適用性試驗  以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(色譜柱內(nèi)徑2.1mm);以乙腈為流動相A,水為流動相B,按下表中的規(guī)定進行梯度洗脫;流速為0.35ml/min;柱溫為40℃;采用質(zhì)譜檢測器,電噴霧負(fù)離子模式(ESI-),進行多反應(yīng)監(jiān)測(MRM),選擇質(zhì)荷比m/z799.6→653.6和m/z799.6→491.6作為檢測離子對。
 
對照品溶液的制備  取擬人參皂苷F11對照品適量,精密稱定,加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液,精密量取適量,用20%乙腈稀釋制成每1ml含0.4ng的溶液,即得。
 
供試品溶液的制備  取本品水蜜丸,研細(xì),取約1.5g;或取小蜜丸或大蜜丸,剪碎,取約2.25g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入80%甲醇25ml,密塞,稱定重量,置80℃水浴中加熱回流75分鐘,取出,放冷,再稱定重量,用80%甲醇補足減失的重量,搖勻,濾過,精密量取續(xù)濾液1ml,置100ml量瓶中,加20%乙腈稀釋至刻度,搖勻,濾過,即得。
 
測定法  分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5µl,注入高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀,測定。
 
判定原則  (1)供試品的提取離子流色譜中,未同時出現(xiàn)與對照品溶液色譜相應(yīng)的色譜峰,視為未檢出;(2)供試品的提取離子流色譜中,同時出現(xiàn)與對照品溶液色譜相應(yīng)的色譜峰,且供試品色譜中m/z799.6→653.6的色譜峰面積值不大于對照品溶液中相應(yīng)的峰面積值者,視為未檢出;(3)供試品的提取離子流色譜中,同時出現(xiàn)與對照品溶液色譜相應(yīng)的色譜峰,且供試品色譜中m/z799.6→653.6的色譜峰面積值大于對照品溶液中相應(yīng)的峰面積值者,視為檢出。
 
消糜栓中擬人參皂苷F11檢查項補充檢驗方法

【檢查】擬人參皂苷F11  照高效液相色譜法(中國藥典2020年版通則0512)和質(zhì)譜法(中國藥典2020年版通則0431)測定。
 
色譜、質(zhì)譜條件與系統(tǒng)適用性試驗  以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(色譜柱內(nèi)徑2.1mm);以乙腈為流動相A,水為流動相B,按下表中的規(guī)定進行梯度洗脫;流速為0.35ml/min;柱溫為40℃;采用質(zhì)譜檢測器,電噴霧負(fù)離子模式(ESI-),進行多反應(yīng)監(jiān)測(MRM),選擇質(zhì)荷比m/z799.6→653.6和m/z799.6→491.6作為檢測離子對。
 
對照品溶液的制備  取擬人參皂苷F11對照品適量,精密稱定,加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液,精密量取適量,用20%乙腈稀釋制成每1ml含4ng的溶液,即得。
 
供試品溶液的制備  取本品10粒,剪碎,取約3g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入80%甲醇25ml,密塞,稱定重量,置80℃水浴中加熱回流75分鐘,取出,放冷,再稱定重量,用80%甲醇補足減失的重量,搖勻,濾過,精密量取續(xù)濾液1ml,置100ml量瓶中,加20%乙腈稀釋至刻度,搖勻,濾過,即得。
 
測定法  分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5µl,注入高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀,測定,記錄色譜圖。
 
判定原則  (1)供試品的提取離子流色譜中,未同時出現(xiàn)與對照品溶液色譜相應(yīng)的色譜峰,視為未檢出;(2)供試品的提取離子流色譜中,同時出現(xiàn)與對照品溶液色譜相應(yīng)的色譜峰,且供試品色譜中m/z 799.6→653.6的色譜峰面積值不大于對照品溶液中相應(yīng)的峰面積值者,視為未檢出;(3)供試品的提取離子流色譜中,同時出現(xiàn)與對照品溶液色譜相應(yīng)的色譜峰,且供試品色譜中m/z 799.6→653.6的色譜峰面積值大于對照品溶液中相應(yīng)的峰面積值者,視為檢出。