一般HPLC分析常用六通進(jìn)樣閥，其關(guān)鍵部件由圓形密封墊（轉(zhuǎn)子）和固定底座（定子）組成。由于閥接頭和連接管死體積的存在，柱效率低于隔膜進(jìn)樣（約下降5-10%左右），但耐高壓（35-10MPa），進(jìn)樣量準(zhǔn)確，重復(fù)性好（0.5%），操作方便。 進(jìn)樣裝置要求：密封性好，死體積小，重復(fù)性好，保證中心進(jìn)樣，進(jìn)樣時對色譜系統(tǒng)的壓力、流量影響小。

         

液相色譜進(jìn)樣器有手動和自動兩種，隨著系統(tǒng)自動化的推進(jìn)，自動進(jìn)樣器已漸趨普及。但是手動進(jìn)樣閥的使用量還是比較大的，尤其是在企業(yè)中。我們平時在使用手動進(jìn)樣閥進(jìn)樣時，一般并沒有特別留意，但，如果使用方法不當(dāng)，也會引起色譜圖上出現(xiàn)不良峰型、做標(biāo)準(zhǔn)曲線時線性關(guān)系差、產(chǎn)生漏液等現(xiàn)象，導(dǎo)致分析出現(xiàn)異常。這里以7725型手動進(jìn)樣器為例，簡述避免故障，正確使用的注意事項。
 
一、手動進(jìn)樣六通閥結(jié)構(gòu)
 
7725型手動進(jìn)樣閥是目前使用zui廣泛的高壓平面進(jìn)樣閥。其結(jié)構(gòu)如上圖所示。它由定子、轉(zhuǎn)子密封墊、轉(zhuǎn)子、手柄等組成，在定子上刻有6個號碼，在安裝時，將5號和6號用附屬的管路連接。注意：2號必須與泵相連接，3號必須與柱相連接。在（load）的狀態(tài)（手柄向左旋）下，流動相不經(jīng)過定量環(huán)直接進(jìn)入柱，此時用微量注射器注入樣品，樣品液流入定量環(huán)，過量的樣品液從排液管（廢液管）流入廢液瓶。接著進(jìn)樣（手柄向右旋）處于（Inject）時，由于轉(zhuǎn)子的旋轉(zhuǎn)，定量環(huán)與3號排出管路相接，定量環(huán)中的樣品液被送入柱中。
 
二、液相色譜儀進(jìn)樣操作
 
進(jìn)樣的方法有環(huán)路全量進(jìn)樣和部分進(jìn)樣兩種。標(biāo)準(zhǔn)附屬的定量環(huán)為20 µl或10 µl，如果用約50~100 µl的微量注射器注入全量的話，則環(huán)路被清洗，并且環(huán)路被樣品完全充滿。如果用此方法進(jìn)樣，則屬于“環(huán)路進(jìn)樣”能保證有20 µl樣品量注入，這樣做重現(xiàn)性較好。這就是全量進(jìn)樣的方法。一般定量分析均采用此方法進(jìn)樣。部分進(jìn)樣的方法是在以環(huán)路容量作為zui大的范圍下，通過微量注射器注入樣品進(jìn)行進(jìn)樣。采用此方法微量注射器的計量誤差將嚴(yán)重影響重現(xiàn)性，但也有其有利性，樣品的配制濃度可以較高，尤其適用于定性分析。不論何種方法，使用7125型進(jìn)樣器時，不必取下微量注射器，轉(zhuǎn)動把手即可進(jìn)樣。為了保持針端的密封形狀準(zhǔn)確，平時請將微量注射器或附帶的針插上。
 
三、手動進(jìn)樣六通閥的清洗和保養(yǎng)
 
留在進(jìn)樣閥注射針導(dǎo)入口的殘余樣品易引起交叉污染（Cross Contamination），在重復(fù)進(jìn)樣時會給工作帶來影響。在正常情況下不必每次進(jìn)樣后都沖洗進(jìn)樣閥注射針導(dǎo)入口。但是，在進(jìn)樣針頭插入或拔出過程中，會有痕量的樣品沉積在針頭密封區(qū)域，這樣，就需要在工作結(jié)束時或進(jìn)樣間歇時，用附帶的聚四氟乙烯針和注射頭注入水或甲醇、乙腈清洗進(jìn)樣閥注射針導(dǎo)入口，此時進(jìn)樣閥手柄應(yīng)向右轉(zhuǎn)處于（Inject）位，注意不要把針頭插入。
 
注意：當(dāng)進(jìn)過高濃度樣品時，更要及時清洗。
 
四、手動進(jìn)樣六通閥漏液的產(chǎn)生原因和處理
 
1、長期使用后，因為轉(zhuǎn)子的旋轉(zhuǎn)，其與定子的摩擦，會產(chǎn)生轉(zhuǎn)子密封墊的磨損，產(chǎn)生漏液。此時漏液亦可能向其他流路泄漏，導(dǎo)致色譜圖的異常。
 
處理方法：更換7725型的轉(zhuǎn)子密封墊。
 
2、密封墊表面有劃痕。
 
在更換進(jìn)樣閥密封圈時，你會發(fā)現(xiàn)密封圈上有細(xì)微的劃痕。漏液就是由這些劃痕引起的。這是因為，有些微量注射器的表面不夠光滑（肉眼是看不出的），進(jìn)樣時，在密封圈上留下的。
 
建議：使用進(jìn)口或質(zhì)量好的微量注射器，以減少進(jìn)樣閥密封圈的受損幾率和更換頻率。還有，當(dāng)流動相中存在微小的固體時，或者是鹽析出，都會在進(jìn)樣閥密封圈表面留下劃痕。因此，流動相要在使用前過濾;使用含鹽的緩沖液作流動相時，要注意鹽的析出，并及時用水沖洗。
 
五、其它
 
1、耐壓性
 
7725型的耐壓為350Kgf/cm2。通常這已經(jīng)足夠了，但如有特殊的使用目的，可以通過增緊定子螺栓來達(dá)到500Kgf/cm2的耐壓規(guī)格。不過為延長使用期，建議在較低耐壓規(guī)格下使用為宜。
 
2、密封圈材質(zhì)
 
一般，7725型的密封材料使用的是被稱作BESPEL®的聚酰亞胺，因此不可用于pH10以上的堿性流動相。此外，自動進(jìn)樣器SIL-10A、10Avp上用的也是BESPEL®。
 
譜析友情提示：在每次使用后，尤其是進(jìn)濃度差異比較大的樣品時要用專用工具（不是帶針頭的注射器）沖洗進(jìn)樣閥，沖洗時必須沖洗進(jìn)樣閥兩頭數(shù)次，每次數(shù)毫升。以防止無機鹽沉積和樣品微粒造成閥內(nèi)部磨損或阻塞以及樣品的交叉污染。要使用專用的液相注射器進(jìn)樣，注射器前應(yīng)用專用的樣品過濾器。